اسدالله نوروزی؛ بهمن حسینی؛ مراد جعفری؛ منوچهر فرجامی نژاد
چکیده
بذرالبنج مشبک (Hyoscyamus reticulatus L.) سرشار از آلکالوئیدهای تروپانی هیوسیامین و اسکوپولامین میباشد که بهطور وسیع در داروسازی مورد استفاده قرار میگیرد. اینتحقیق بهمنظور بررسی اثر غلظتهای مختلف (صفر، 50، 100 و 200 میکرومولار) متیل جاسمونات و مدت زمان تیمار 24 و 48 ساعت بر میزان رشد، فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدانی، میزان آلکالوئیدهای تروپانی ...
بیشتر
بذرالبنج مشبک (Hyoscyamus reticulatus L.) سرشار از آلکالوئیدهای تروپانی هیوسیامین و اسکوپولامین میباشد که بهطور وسیع در داروسازی مورد استفاده قرار میگیرد. اینتحقیق بهمنظور بررسی اثر غلظتهای مختلف (صفر، 50، 100 و 200 میکرومولار) متیل جاسمونات و مدت زمان تیمار 24 و 48 ساعت بر میزان رشد، فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدانی، میزان آلکالوئیدهای تروپانی و میزان بیان ژن هیوسیامین-6-بتا-هیدروکسیلاز (h6h) در ریشههای موئین بذرالبنج مشبک بهصورت فاکتوریل در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی و با 3 تکرار انجام شد. بررسی میزان رشد در نمونههای شاهد و تیمار شده، نشان داد که میزان وزن تر و خشک ریشههای موئین با شیب ملایمی در نمونههای تهییج شده رو به کاهش میباشد. همچنین نتایج تجزیه واریانس نشان داد که تیمار با متیل جاسمونات (غلظت 200 و 100 میکرومولار)، تأثیرات معنیداری در سطح احتمال 1% بر فعالیت آنزیمهای کاتالاز، گایاکول پراکسیداز و آسکوبات پراکسیداز داشت. همچنین مدت زمان تیمار (24 و 48 ساعت) متیل جاسمونات بهاستثناء آنزیم آسکوربات پراکسیداز، تأثیر معنیداری در سطح احتمال 1% بر فعالیت هر دو آنزیم کاتالاز و گایاکول پراکسیداز نشان داد. نتایج آنالیز GC/MS نشان داد که در تیمار با متیل جاسمونات بیشترین میزان تولید هیوسیامین و اسکوپولامین (21.9% و 13.96%) بهترتیب در اثر تیمار با غلظتهای 200 و 100 میکرومولار به مدت 48 و 24 ساعت بدست آمد، که 1.6 و 1.25 برابر بیشتر نسبت به تیمار شاهد (بهترتیب 13.67% و 11.13%) بوده است. سطح بیان ژن هیوسیامین-6-بتا-هیدروکسیلاز با روش RT-PCR نیمه کمّی بررسی شد. نتایج نشان داد در تیمار متیل جاسمونات بیشترین میزان بیان ژن h6h (6 برابر بیشتر نسبت به شاهد) در غلظت 100 میکرومولار به مدت 24 ساعت بدست آمد. براساس نتایج، چنین استنباط میشود که محرک متیل جاسمونات احتمالاً بهدلیل تحریک بیان ژنهای مؤثر در مسیر تولید آلکالوئیدهای تروپانی، در افزایش تولید هیوسیامین و اسکوپولامین مؤثر باشد.
ایرج برنوسی؛ مراد جعفری؛ جواد احمدی دیزجی
چکیده
در این مطالعه، اثر دو روش تلقیح (شناورسازی و اسپری) و دو سویه Agrobacterium rhizogenes (A13 و GMI9534) برای القاء ریشههای مویین روی ریزنمونههای مختلف (هیپوکوتیل، کوتیلدون، برگ و گره ساقه Teucrium chamaedrys L. بررسی شد. سویه GMI9534 نتوانست در هیچیک از ریزنمونهها ریشه مویین القاء کند، در حالیکه سویه A13 فقط قادر به القاء ریشههای مویین روی ریزنمونههای ...
بیشتر
در این مطالعه، اثر دو روش تلقیح (شناورسازی و اسپری) و دو سویه Agrobacterium rhizogenes (A13 و GMI9534) برای القاء ریشههای مویین روی ریزنمونههای مختلف (هیپوکوتیل، کوتیلدون، برگ و گره ساقه Teucrium chamaedrys L. بررسی شد. سویه GMI9534 نتوانست در هیچیک از ریزنمونهها ریشه مویین القاء کند، در حالیکه سویه A13 فقط قادر به القاء ریشههای مویین روی ریزنمونههای برگ و گره ساقه بود. البته روش تلقیح شناورسازی، با فراوانی بالای القای ریشه مویین (بیش از 3/73%)، بسیار موفقیتآمیز بود و ریزنمونههای برگ بالاترین فراوانی القاء (3/83%) را نشان دادند. لاینهای ریشه مویین تراریخته بهوسیله آنالیز PCR با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ژنهای rolA و rolB تأیید شدند. 20 لاین ریشه مویین مستقل از هم، کشت شده روی محیط کشت MS جامد عاری از تنظیمکننده رشد، تفاوت معنیداری از نظر طول کلی و انشعابدهی ریشه داشتند. این متغیرها در تمام واکشتها پایدار بودند، از اینرو 7 لاین ریشه مویین براساس این خصوصیات رشدی انتخاب شدند. متعاقباً، کشتهایی از لاینهای انتخاب شده در محیط کشت MS مایع نصف غلظت برای پیگیری میزان تولید زیستتوده در یک دوره کشت 90 روزه فراهم شد. بین لاینها تنوع قابل توجهی از نظر ظرفیت رشدی مشاهده شد. لاین TC-HR-16 بیشترین مقدار زیستتوده تر (9100 میلیگرم در هر 30 میلیلیتر محیط کشت) را با 455 برابر افزایش نسبت به مایع تلقیح اولیه در طی دوره کشت 10 هفتهای تولید کرد. لاینهای ریشه مویین با خصوصیات عالی حاصل از این مطالعه میتوانند برای بهبود تولید متابولیتهای ثانویه باارزش دارویی Teucrium chamaedrys L. استفاده شوند.